Un equipo conjunto de China proporcionó recientemente un método de detección cuantitativa, multiplexado y sensible para el diagnóstico precoz y la terapia dirigida de las neoplasias mieloproliferativas, un tipo de tumor hematológico crónico que se acompaña de insuficiencia de la médula ósea o leucemia.
El equipo, el Instituto Suzhou de Ingeniería Biomédica y Tecnología de la Academia China de Ciencias y el Hospital Huashan, establecieron una plataforma de amplificación isotérmica mediada por bucle digital asistida por nanopartículas (nano-dLAMP) para el análisis de neoplasias mieloproliferativas.
La reacción en cadena de la polimerasa digital (PCR digital, dPCR), una tecnología de detección de ácidos nucleicos cuantitativa absoluta y de alta tolerancia de alta sensibilidad, juega un papel importante en una variedad de campos de aplicación, como la detección de mutaciones raras, variación del número de copias, biopsia líquida , análisis unicelular, detección modificada genéticamente, prueba de carga viral y análisis microbiológico cuantitativo.
En este estudio, los investigadores fabricaron chips de microarrays con cuatro particiones físicas para la detección simultánea de mutaciones de calreticulina tipo 1, calreticulina tipo 2, janus quinasa 2 V617F y un gen de referencia interno.
Luego utilizaron nanopartículas y aditivos de PCR para hacer que la amplificación isotérmica mediada por bucle tradicional (LAMP) fuera adecuada para la amplificación a escala de nanolitros.
Los resultados sugirieron que las nanopartículas podrían mejorar el rendimiento de amplificación del nanolitro LAMP.
La detección cuantitativa de los principales marcadores moleculares de neoplasias mieloproliferativas podría realizarse simultáneamente en un chip de microarrays de cuatro particiones en una hora. El acuerdo entre la plataforma desarrollada y el Quantstudio 3D comercial fue alto en un 99%.
Esta plataforma nano-dLAMP precisa, rápida, multiplex y económica podría ser una herramienta prometedora para el diagnóstico clínico en el futuro, según los investigadores.
El grupo se ha centrado en el campo de los biosensores durante más de 10 años y ha acumulado una base sólida en el desarrollo de métodos de biosensores, diseño y procesamiento de biochips y desarrollo de instrumentos de biociencia.
En la investigación y el desarrollo de la PCR digital, se desarrolló el método dPCR (cdPCR) basado en chips con alta estabilidad de aislamiento, buena uniformidad de temperatura y alta velocidad de detección. Se obtuvo una serie de avances en el método de detección, chip, reactivo e instrumento de cdPCR.
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