Tecnologia de detecção de PCR digital baseada em chip e instrumento desenvolvido

Atualização: 6 de agosto de 2023
Tecnologia de detecção de PCR digital baseada em chip e instrumento desenvolvido

Uma equipe conjunta da China forneceu recentemente um método de detecção sensível, multiplexado e quantitativo para o diagnóstico precoce e terapia direcionada de neoplasias mieloproliferativas, um tipo de tumor hematológico crônico que é acompanhado por insuficiência da medula óssea ou leucemia.

A equipe, o Instituto de Engenharia Biomédica de Suzhou e Equipar da Academia Chinesa de Ciências e do Hospital Huashan, estabeleceu uma plataforma de amplificação isotérmica mediada por loop digital assistida por nanopartículas (nano-dLAMP) para a análise de neoplasias mieloproliferativas.

A reação em cadeia da polimerase digital (PCR digital, dPCR), uma tecnologia de detecção de ácido nucleico de alta sensibilidade, quantitativa absoluta e de alta tolerância, desempenha um papel importante em uma variedade de campos de aplicação, como detecção de mutações raras, variação do número de cópias, biópsia líquida , análise de uma única célula, detecção geneticamente modificada, teste de carga viral e análise microbiológica quantitativa.

Neste estudo, os pesquisadores fabricaram chips de microarray com quatro partições físicas para a detecção simultânea de calreticulina tipo 1, calreticulina tipo 2, mutações janus quinase 2 V617F e um gene de referência interno.

Eles então usaram aditivos de PCR e nanopartículas para tornar a amplificação isotérmica mediada por loop tradicional (LAMP) adequada para amplificação em escala de nanolitro.

Os resultados sugeriram que as nanopartículas poderiam melhorar o desempenho de amplificação do nanolitro LAMP.

A detecção quantitativa dos principais marcadores moleculares de neoplasias mieloproliferativas pode ser realizada simultaneamente em um chip de microarray de quatro partições em uma hora. O acordo entre a plataforma desenvolvida e o comercial Quantstudio 3D foi de 99%.

Esta plataforma nano-dLAMP precisa, rápida, multiplex e barata pode ser uma ferramenta promissora para o diagnóstico clínico no futuro, de acordo com os pesquisadores.

O grupo tem se concentrado no campo de biossensores por mais de 10 anos e acumulou uma base sólida no desenvolvimento de métodos de biossensores, design e processamento de biochips e desenvolvimento de instrumentos de biociências.

Na pesquisa e desenvolvimento de PCR digital, foi desenvolvido o método dPCR baseado em chip (cdPCR) com alta estabilidade de isolamento, boa uniformidade de temperatura e velocidade de detecção rápida. Uma série de progressos foi obtida no método de detecção, lasca, reagente e instrumento de cdPCR.

 

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