Un team congiunto cinese ha recentemente fornito un metodo di rilevamento quantitativo sensibile, multiplexing per la diagnosi precoce e la terapia mirata delle neoplasie mieloproliferative, un tipo di tumore ematologico cronico che è accompagnato da insufficienza del midollo osseo o leucemia.
Il team, l'Istituto di ingegneria biomedica di Suzhou e Tecnologia dell'Accademia Cinese delle Scienze e dell'Ospedale Huashan, hanno creato una piattaforma di amplificazione isotermica mediata da loop digitale assistita da nanoparticelle (nano-dLAMP) per l'analisi delle neoplasie mieloproliferative.
La reazione a catena della polimerasi digitale (PCR digitale, dPCR), una tecnologia di rilevamento dell'acido nucleico ad alta sensibilità, quantitativa assoluta e ad alta tolleranza, svolge un ruolo importante in una varietà di campi di applicazione, come rilevamento di mutazioni rare, variazione del numero di copie, biopsia liquida , analisi di una singola cellula, rilevamento geneticamente modificato, test della carica virale e analisi quantitativa microbiologica.
In questo studio, i ricercatori hanno fabbricato chip di microarray con quattro partizioni fisiche per il rilevamento simultaneo di mutazioni di calreticulina di tipo 1, calreticulina di tipo 2, janus chinasi 2 V617F e un gene di riferimento interno.
Hanno quindi utilizzato additivi per PCR e nanoparticelle per rendere la tradizionale amplificazione isotermica mediata da loop (LAMP) adatta per l'amplificazione su scala nanometrica.
I risultati hanno suggerito che le nanoparticelle potrebbero migliorare le prestazioni di amplificazione di LAMP da nanolitri.
La rilevazione quantitativa dei principali marcatori molecolari delle neoplasie mieloproliferative potrebbe essere eseguita simultaneamente in un chip di microarray a quattro partizioni entro un'ora. L'accordo tra la piattaforma sviluppata e il commerciale Quantstudio 3D è stato elevato al 99%.
Secondo i ricercatori, questa piattaforma nano-dLAMP accurata, rapida, multiplex ed economica potrebbe essere uno strumento promettente per la diagnosi clinica in futuro.
Il gruppo si è concentrato sul campo dei biosensori per più di 10 anni e ha accumulato solide basi nello sviluppo di metodi di biosensori, progettazione e lavorazione di biochip e sviluppo di strumenti di bioscienza.
Nella ricerca e sviluppo della PCR digitale, sono stati sviluppati il metodo dPCR (cdPCR) basato su chip con elevata stabilità di isolamento, buona uniformità di temperatura e velocità di rilevamento rapida. Sono stati ottenuti una serie di progressi sul metodo di rilevamento, patata fritta, reagente e strumento di cdPCR.
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